项目负责人：李文惠
糖尿病溃疡发生发展过程中伴随着血管内皮细胞的功能障碍及增殖迁移不足状态，内皮细胞特异性调节因子 miR-216在维持内皮细胞功能稳定、血管壁完整及促进创面愈合中作用重大。前期研究提示“煨脓长肉”中药紫朱软膏促进糖尿病溃疡愈合或通过 miR-216实现。
本研究以动物模型及血管内皮细胞为研究平台，以宏基因组学技术为切入点，研究 miRNA 在血管内皮细胞相关血管生成过程中的作用，以期解决“煨脓长肉”中药紫朱软膏通过调节 miR-216动态表达，协调血管内皮细胞功能，促进溃疡愈合的关键问题。
体内实验提示，相比非糖尿病溃疡组（NUC），糖尿病溃疡组（DUC）中血管生成受到抑制，表现为 VEGFa/ANG2 表达下降，而 PI3KR2/SPRED1 表达升高；紫朱软膏治疗组（DUZ）可加快血管生成，并促进溃疡愈合。测序结果表明，相比 NUC 组，DUC 组溃疡组织种共筛选出 1072 种已知 miRNAs，其中94种有差异明显；溃疡用药前后(DUZ/DUC)，共筛选出1056种已知 miRNAs，其中57种有差异明显；其中 miR-126a-5p在造模后表达下降，用药后有明显升高。
体外利用 BEND.3 构建高糖高脂损伤模型，通过划痕实验、Annexin-V/PI双染实验，发现紫朱醇提物能促进细胞迁移并减少凋亡；紫朱醇提物通过提高miR126a-5p 促进血管生成，用药组成管实验中成管数量明显增加，血管生成相关基因蛋白表达也明显升高，PI3K/AKT 信号通路呈激活状态。以 293T 细胞为对象，通过细胞转染、RNA 干扰、双荧光素酶报告基因实验证实 miR-126通过靶向PIK3R2 参与血管生成。
结论：紫朱软膏能促进血管新生，可能是通过上调 miR-126a-5p靶向PIK3R2激活 PI3K/Akt信号通路实现的，这也为“煨脓长肉”中药治疗糖尿病溃疡提供了新的实验基础。